Mise en évidence des tissus cibles de l'auxine : le test Pisum
Ce test a été réalisé la première fois
sur le pois, d'où son nom. En classe, il est plus facile de le
réaliser sur des hypocotyles de soja. Il a pour objectif de préciser
comment agit l'auxine sur les cellules cibles.
• Protocole expérimental :
- Mettre à tremper des graines de soja pendant 24 heures dans de l'eau.
- Disposer ces graines dans un bac avec au fond deux à trois couches de papier ménage.
- Bien humecter mais ne pas noyer les graines.
- Éclairer les germinations avec une lampe disposée verticalement au dessus des cultures.
Les photos ci-dessous montrent les germinations à deux et à cinq jours :
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Germinations
de deux jours
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Germinations
de cinq jours
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Exercice
: reconnaître
les différentes parties d'une germination de soja
- Après cinq jours de culture, récolter 42 hypocotyles de 3 cm de longueur, en fendre 30 dans la partie supérieure sur 1,5 cm.
- Disposer dans 6 boîtes de pétri contenant 10 ml de solution d'AIA (acide indoly-acétique) à une concentration de 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 mmoles/ L et 10 ml d'eau.
• Acquisition des résultats :
- Disposer les 6 boîtes sur un scanner. Réaliser une scannérisation toutes les heures. Pour cela il est possible de déclencher le scanner automatiquement à l'aide du logiciel SERISCAN téléchargeable sur le site de l'académie d'Amiens.
Voici l'image obtenue au bout de 20 heures dans les boîtes de Pétri :
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D'autres images : au
début |
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• Traitement des résultats :
Il est possible de réaliser seulement l'observation des courbures, mais une méthode plus précise consiste à mesurer l'angle des courbures des deux branches du Y. Voici un exemple montrant comment tracer ces angles sur une boîte de pétri.
Pour avoir de bonnes
valeurs, un calcul de moyenne est nécessaire.
Dans ces expériences,
une concentration d'hormone à 10-4 mmoles/L semble la
plus rapidement efficace (5 heures) pour obtenir une courbure significative.
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